Resposta imune induzida por antígenos de Mycoplasma hyopneumoniae avaliados como vacina de DNA ou subunidade recombinante.
Resumo
Mycoplasma hyopneumoniae é o agente etiológico da Pneumonia Enzoótica
Suína (PES), uma das doenças respiratórias de maior incidência na criação de
suínos no mundo. As vacinas disponíveis comercialmente consistem de células
inteiras inativadas (bacterina), as quais proporcionam apenas uma proteção
parcial e não previnem a colonização pelo microrganismo. Neste contexto, faz-se
necessária a busca de novas alternativas para a profilaxia da PES. Alguns
antígenos vêm sendo testados em diferentes sistemas de vacinação, porém
nenhum deles foi mais eficiente que as bacterinas comerciais no controle da PES.
Este trabalho teve como objetivo a produção e avaliação da antigenicidade e
imunogenicidade de antígenos de M. hyopneumoniae administrados como vacinas
de DNA e/ou subunidade recombinante, visando o desenvolvimento de uma
vacina contra a PES. As vacinas de subunidade recombinante foram obtidas
através da expressão de onze proteínas recombinantes de M. hyopneumoniae em E.
coli e purificação por cromatografia de afinidade, enquanto que as vacinas de DNA
foram obtidas pela clonagem de quatro genes de M. hyopneumoniae no vetor
pcDNA3. A antigenicidade das proteínas recombinantes foi verificada
confrontando-as com soro de suínos convalescentes. A imunidade humoral e
celular destas vacinas foi avaliada em camundongos imunizados
intramuscularmente. Todas as proteínas recombinantes avaliadas foram
reconhecidas pelo soro de animais convalescentes, em ensaios de ELISA e/ou
Western blot, em especial a proteína MHP0418, indicando serem expressas
durante o processo infeccioso. Estas proteínas recombinantes, bem como P37,
P42, P46 e P95 apresentaram capacidade imunogênica, induzindo ambas as
respostas imune Th1 e Th2. As proteínas P37, P42, P46 e P95, e a vacina de
DNA pcDNa3/P46 também foram capazes de induzir a expressão de INFγ,
citocina associada a resposta imune celular e reduzir a expressão de TNFα e IL1,
relacionadas com as lesões em suínos, durante infecção por M. hyopneumoniae,
sugerindo o potencial destas como candidatas vacinais. A estratégia de
imunização utilizando proteínas combinadas potencializou a resposta imune,
sendo que as proteínas MHP0443 e MHP0372 foram as principais responsáveis
pela imunogenicidade induzida pelos Mix1 e Mix2, respectivamente. Além disso,
MHP0107, MHP0418 e MHP0372 induziram anticorpos que reagiram
especifiamente contra proteínas das cepas 7448, 4722 e J de M. hyopneumoniae,
não apresentando reação cruzada com M. hyohinis e M. flocculare, podendo,
portanto, serem utilizadas em ensaios de imunodiagnóstico.