Oócitos eqüinos: maturação in vitro e vitrificação
Resumo
A maturação in vitro e a criopreservação de oócitos, são pontos críticos da produção
in vitro de embriões, tendo utilização limitada na reprodução assistida de eqüinos,
devido aos baixos resultados obtidos com estas biotécnicas nesta espécie. O artigo
1 teve como objetivo examinar o efeito da suplementação com cisteamina ao meio
de maturação in vitro de oócitos eqüinos, através da análise de viabilidade de
membrana e da taxa de maturação nuclear. No artigo 2, o objetivo foi avaliar os
métodos de vitrificação em palhetas abertas estendidas (OPS) e em superfície sólida
(SSV) com a adição de bloqueador sintético da formação de gelo (Supercool X-
1000 ), em oócitos eqüinos imaturos, através da análise da viabilidade de
membrana e da taxa de maturação in vitro. No artigo 1, os oócitos foram divididos
em três grupos de acordo ao tratamento de maturação in vitro: 1) meio
suplementado com 50µM de cisteamina; 2) meio suplementado com 100µM de
cisteamina; 3) controle. Após a maturação in vitro, os oócitos desnudos foram
corados e avaliados quanto à maturação nuclear e viabilidade de membrana. O
grupo 2 apresentou maior (P = 0.0417) taxa de maturação nuclear (53.6%), quando
comparado ao grupo 1 (42.5%) e 3 (43.2%), já na viabilidade de membrana, não foi
observada diferença (P < 0,05) entre os tratamentos. No artigo 2, experimento 1, os
oócitos foram divididos entre controle e os métodos de vitrificação, OPS e SSV,
expostos ou não ao X-1000. Foi observada uma maior taxa maturação (P < 0.005)
no grupo OPS com X-1000 (20.3%) em relação ao OPS sem X-1000 (11.8%), SSV
com (11.4%) e SSV sem X-1000 (12.1%). No experimento 2, foi realizado um teste
de toxicidade, expondo os oócitos a soluções de vitrificação OPS e SSV com adição
de 1%, 0,1% e sem X-1000. Foi observada uma maior taxa de maturação no SSV
com 0,1% de X-1000 (61.4%) em relação aos demais grupos. No experimento 3, a
vitrificação por OPS e SSV foi adicionada de 1% ou 0,1% de X-1000, não mostrando
diferença (P > 0.005) entre a maturação nuclear e a viabilidade de membrana destes
grupos. No artigo 1, concluiu-se que a suplementação de 100µM de cisteamina ao
meio de maturação in vitro de oócitos eqüinos aumentou a taxa de maturação
nuclear, e não apresentou efeito na viabilidade de membrana. No artigo 2, foi
concluído que os métodos de vitrificação OPS e SSV permitem a criopreservação de
oócitos eqüinos imaturos, a adição de X-1000 parece diminuir a toxicidade das
soluções crioprotetoras, e a vitrificação por OPS com X-1000 mostrou ter resultado
mais satisfatório.