Otimização de protocolo para produção de plantas duplo-haploides através da cultura de micrósporos isolados de trigo
Resumo
No Brasil, a cultura do trigo ocupa lugar de destaque nos sistemas de produção da
Região Sul, representando uma opção muito importante como um cereal de inverno.
O melhoramento genético das culturas autógamas tem contado com vários métodos
para produzir cultivares mais recentes e superiores com características melhoradas.
Um exemplo muito bem sucedido tem sido o método de produção de plantas duplohaploides usado para acelerar o desenvolvimento de uma nova cultivar. Em trigo, a
cultura de micrósporos isolados tem sido usada para a obtenção de plantas duplohaploides. No entanto, esta técnica tem sido caracterizada como altamente
genótipo-dependente e de produzir altas taxas de plantas albinas. Assim, o objetivo
deste trabalho foi otimizar um protocolo através da cultura in vitro de micrósporos
isolados utilizando-se genótipo de trigo com alta produção de plantas albinas. Para
este estudo, plantas F1 oriundas do cruzamento de trigo entre Toropi x BRS 194
foram usadas como doadoras de micrósporos. Foram realizados três experimentos.
No primeiro experimento, anteras foram removidas das espiguetas e tratadas em
três soluções de pré-tratamentos à 4°C: a) manitol (62 g L-1) + 15 µM de sulfato de
cobre (CuSO4.5H20); b) manitol (62 g L-1) e c) 15 µM de sulfato de cobre. No
segundo experimento, foram testadas as mesmas soluções de pré-tratamento do
experimento anterior, com a diferença de que neste experimento, espiguetas inteiras
foram usadas para o pré-tratamento. No terceiro experimento, somente o pré-
tratamento a frio foi aplicado nas espigas e houve uma modificação no meio de
indução, quando foram testados nove tratamentos: controle (meio de indução
padrão); sulfato de cobre (2,0 µM); prolina (10 mM); glutationa (2,0 µM); cefotaxima
(100 mg L-1); sulfato de cobre (4,0 µM); sulfato de cobre (2,0 µM) + prolina (10 mM);
sulfato de cobre (2,0 µM) + glutationa (2,0 µM); sulfato de cobre (2,0 µM) +
cefotaxima (100 mg L-1). Os resultados obtidos nos experimentos 1 e 2 mostrou que
a solução de pré-tratamento contendo 15 µM de sulfato de cobre foi mais eficiente
para desencadear a embriogênese dos micrósporos e regenerar plantas verdes em
trigo. No terceiro experimento, o meio de indução suplementado com 100 mg L-1 de
cefotaxima mostrou um aumento na formação de embriões e também na
regeneração de plantas verdes.
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