Lipossomas na criopreservação de sêmen de suínos
Resumo
No Brasil, a inseminação artificial, representa 95% dos acasalamentos, sendo que
mais de 99% são realizadas com sêmen refrigerado a 17°C, por causa o processo de
criopreservação ocasiona diversos danos aos espermatozoides. Tais como, maior
desidratação celular, decorrente da remoção de moléculas polares dos fosfolipídios,
acarretando em alterações de funcionalidade. Com isso, pesquisas apontam que
manter o sêmen diluído por até 24 horas a uma temperatura acima de 15°C é benéfico
ao espermatozoide. Além disso, estudos apontam que acrescentar lipossomas ao
diluente durante o processo de criopreservação, proporciona uma maior resistência
dos espermatozoides ao frio. Por isso os objetivos desse estudo foram: a) avaliar a
citotoxicidade do lipossoma comercial S100 com 98% de fosfatidilcolina em células
espermáticas de suínos; b) avaliar do lipossoma comercial S45 junto a diluente de
refrigeração em células espermáticas de suínos armazenadas a 17°C e 5°C. No
primeiro estudo, foi avaliado a citotoxicidade do lipossoma comercial S100, fabricado
pelo processo de injeção de etanol, com 98% de fosfatidilcolina comercial Lipoid
GmbH (Alemanha), sendo acrescentados ao diluente plasma lactose, sendo testadas
quatro diluições a 5°C e a 17°C de resfriamento por até quatro dias. No segundo
estudo, foi avaliar a adição do lipossoma comercial S45, produzido com lecitinas de
soja desengorduradas com >45% m/m fosfatidilcolina, 10–18% m/m
fosfatidiletanolamina, <4% m/m lisofosfatidilcolina e <3% m/m triacilgliceróis, junto a
diluente de refrigeração no processo hoilding time por até 72h a 17°C e a 5°C. Em
ambos estudos se utilizou células espermáticas de dez machos diferentes (~ 80mL
com ~2,6 bilhões de espermatozoides, cada dose) da mesma linhagem, mantidos em
baias individuais e recebendo a mesma ração. Além disso, em ambas pesquisas,
usou-se quatro diluições de lipossomas (5nM, 3,75nM, 2,5nM, 1,25nM e 0nM),
avaliou-se a cinética espermática pelo sistema automatizado CASA, avaliando MT,
MP, VCL, VSL, VAP, STR, LIN, WOB, BCF, ALH, DCL, DSL, DAP. A partir dos
resultados, notou-se que no primeiro estudo, o lipossoma S100 apresenta uma alta
citotoxicidade em todas a concentrações avaliadas, principalmente quando se
armazena as células espermáticas a 5°C, e quando armazenadas a 17°C a
concentração de 1,25nM. No segundo estudo, os resultados demonstraram que o
armazenamento a 17°C com a adição de lipossomas proporcionou ganho na cinética
espermática, e as doses armazenadas a 5°C, com a adição de lipossomaspermaneceram viáveis por 24h de armazenamento. Assim conclui-se que o uso do
lipossoma S45 pode ser viável no processo de criopreservação do sêmen suíno por
proporciona uma melhora nos resultados dos parâmetros da cinética espermática. E
uso de lipossomas com alta concentração de fosfatidilcolina, como o caso do
lipossoma S100, é citotóxico para as células espermáticas de suínos, devendo ser
evitado o seu uso.