Avaliação histológica de folículos pré-antrais inclusos em tecido ovariano equino e uso de metodologias ativas no ensino superior
Resumo
A espécie equina tem sido um modelo experimental atraente para a investigação
comparativa da foliculogênese em seres humanos e animais domésticos, devido a
uma série de semelhanças na dinâmica folicular. Neste sentido, a obtenção de tecido
ovariano equino de alta qualidade é crucial para garantir a eficácia das técnicas de
manipulação ovariana. Portanto, é essencial realizar uma análise histológica que
preserve a integridade morfológica do tecido, estabelecendo um protocolo de fixação
adequado para assegurar a preservação dos folículos pré-antrais da forma mais
fidedigna ao tecido ovariano fresco original, mitigando danos. Desta forma, a presente
tese objetivou aprimorar os protocolos de fixação para preservar a morfologia dos
folículos pré-antrais inclusos em tecido ovariano equino. Adicionalmente, foram
formuladas metodologias ativas no desenvolvimento de habilidades de pesquisa junto
a estudantes de graduação em medicina veterinária. No primeiro estudo, ovários (n =
6) de éguas jovens submetidas a ovariectomia foram fragmentados (3 x 3 x 1 mm; 20
fragmentos/ovário). Os fragmentos de tecido ovariano equino foram destinados a
fixação com etanol 70% por curto período (ST-EtOH, 45 minutos) em comparação a
dois fixadores clássicos [solução de Carnoy (CAR) e paraformaldeído a 4% (PFA)] em
diferentes tempos de fixação (6 horas, 12 horas). Após processamento histológico
clássico, as lâminas obtidas foram avaliadas quanto a morfologia (normal ou
anormais), e estágio de desenvolvimento folicular, as densidades de células
foliculares e estromais, além dos diâmetros nucleares dos folículos e oócitos inclusos
em tecido ovariano equino. Como resultado, demonstrou-se que a solução de Carnoy
melhor preservou a morfologia celular de tecido ovariano equino. Observamos que o
paraformaldeído a 4% é um fixador adequado para avaliação morfológica de folículos
pré-antrais, além de possuir a vantagem de ser compatível com técnicas de
imunohistoquímica quando comparado com os demais fixadores. Além disso, o fixador
ST-EtOH se mostrou uma boa alternativa quando é necessária uma avaliação
histológica rápida. Adicionalmente, no segundo estudo foi possível avaliar o
envolvimento dos estudantes de graduação em veterinária na pesquisa, utilizando
metodologias ativas de ensino, visando capacitar os estudantes a adquirir habilidades
essenciais para sua formação, construir conhecimentos científicos e estimular o
pensamento crítico. A experiência da utilização das metodologias ativas contribuiu
para a elaboração de um segundo estudo com foco nos procedimentos de
manipulação de tecido ovariano equino, e fornecendo aos estudantes uma visão mais
abrangente das aplicações práticas e científicas nesta área.