Desenvolvimento de um ELISA com a proteína recombinante LigBrep para o diagnóstico de leptospirose
Resumo
Leptospirose é uma zoonose causada pela infecção de espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira. Possui como portadores da bactéria, os animais selvagens e domésticos. Os humanos são considerados hospedeiros acidentais, por contraírem a leptospirose a partir de uma fonte de infecção animal, principalmente através dos caninos. São reportados, anualmente, mais de 1 milhão de casos severos de leptospirose no mundo, resultando em aproximadamente 59 mil mortes. O teste de diagnóstico considerado padrão para leptospirose é o Teste de microaglutinação (MAT). Porém, o MAT apresenta limitações, como a dificuldade na execução, pois necessita do cultivo de cepas vivas, além de ser um teste subjetivo e apresentar baixa sensibilidade na fase aguda da doença. Dessa forma, existe a necessidade no desenvolvimento de novos testes de diagnóstico, que sejam mais rápidos e eficazes. Sendo assim, esse trabalho tem como objetivo o desenvolvimento de um Teste Imunoenzimático (ELISA) baseado na detecção de anticorpos IgG e IgM nos soros humanos e caninos, utilizando como antígeno a proteína rLigBrep e a rLipL32. Na análise dos soros humanos individuais com o uso do anticorpo IgM os resultados de sensibilidade e especificidade foram de 87,0% e 100%, respectivamente. Com o anticorpo IgG o valor de sensibilidade do teste foi de 92,7% e a especificidade de 71,4%. Dentre os testes com soros caninos avaliando o anticorpo IgG, com a proteína rLigBrep os resultados foram de 99,2% e 95,5% de sensibilidade e especificidade, respectivamente. Avaliando os mesmos soros caninos com a proteína rLipL32, o valor de sensibilidade foi de 90% e especificidade do teste foi de 91%. O valor da análise Kappa dos testes caninos com as proteínas rLigBrep foi de 0,94 e com a rLipL32 foi de 0,790, demonstrando alta concordância com o teste de diagnóstico padrão. Com isso, o teste de ELISA com a proteína rLigBrep apresenta resultados mais promissores do que a proteína rLipL32, sendo uma proteína importante no auxílio para o desenvolvimento de novos testes diagnósticos para leptospirose.