Nanopartículas de lipoproteína de baixa densidade na criopreservação do sêmen canino
Date
2019-04-07Metadata
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Estruturas na escala manométrica apresentam propriedades funcionais únicas, não encontradas na escala macro, devido principalmente à elevada área superficial de contato, que resulta em uma intensa interação com a matriz na qual as nanopartículas estão inseridas. Em diluentes de criopreservação seminal à base de gema de ovo, o principal componente crioprotetor é a lipoproteína de baixa
densidade (LDL). Contudo, a gema de ovo possui outros constituintes que são deletérios para os gametas, neste contexto, a extração das micelas de LDL para congelamento seminal, através da fração plasmática da gema de ovo (EYP) vem demonstrando melhores resultados. Diante do exposto, este trabalho objetivou avaliar diferentes processos de produção nanopartículas de LDL, sobre a qualidade do sêmen canino criopreservado. EYP foi submetido à três sistemas: banho de ultrassom (LDL-B) - 30min em 40A; ponteira de ultrassom (LDL-P) - 50% da amplitude, 30min; homogeneização de alta pressão (LDL-P) - 10.000PSI por 6 ciclos. Propriedades de diâmetro, índice de polidispersão (PDI) e potencial zeta dos diluentes foram avaliados. A qualidade espermática após o descongelamento foi mensurada através do computer-assisted sperm analysis (CASA) e citometria de
fluxo. As nano técnicas aplicadas em EYP modificaram propriedades de diâmetro, PDI e potencial zeta das partículas de LDL. LDL-P caracterizou-se como um sistema monodisperso (PDI = 0,37) e estável, enquanto nos outros grupos experimentais foram obtidas soluções polidispersas. O processamento de EYP formou diluentes de congelamento mais eficazes no controle da produção de espécies reativas de
oxigênio intracelular (P < 0,05). Os sistemas de ultrassom (LDL-B e LDL-P) produziram micelas capazes de manter a maior motilidade espermática total, após o descongelamento (P < 0,05). Comparado ao controle EYP, LDL-P foi mais eficiente na manutenção da motilidade espermática progressiva, integridade e fluidez de membrana (P < 0,05). As nanopartículas LDL-P obtiveram tamanho médio de aproximadamente 250nm, com 0.3 de PDI e -1.15mV de potencial zeta. Sendo
assim, a ultrassonicação por meio de sonda do EYP, demostrou-se um método eficiente para produção de nanopartículas de LDL incrementando a crioproteção durante o congelamento do sêmen canino.
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