Congelamento de sêmen suíno: estudo de crioprotetores intra e extracelulares, metodologias de congelamento e marcador molecular de congelabilidade
Abstract
Apesar do sêmen suíno congelado estar disponível comercialmente deste 1975, o
seu uso tem ocorrido somente em ocasiões específicas, pois, em relação ao uso de
sêmen refrigerado, requer duas a três vezes maior número de espermatozóides por
dose, o processamento do sêmen é trabalhoso, o tamanho da leitegada é diminuído
em um a três leitões por parto e a taxa de parição é menor. Dessa forma, a grande
maioria das inseminações artificiais nessa espécie utiliza sêmen diluído e
acondicionado no estado líquido entre 15 e 18 ºC. Os objetivos desta tese foram:
avaliar diferentes diluidores de resfriamento, metodologias de congelamento,
temperaturas de centrifugação, uso de crioprotetores intracelulares a base de
amidas e extracelulares baseados em lipoproteína de baixa densidade, além do
estudo de fatores protéicos presentes no plasma seminal nos resultados de
avaliações in vitro e in vivo de sêmen suíno congelado-descongelado. Foram
executados cinco experimentos com avaliações da qualidade do sêmen congeladodescongelado,
quatro experimentos com avaliações in vitro (motilidade e integridade
de membrana) e um experimento com fertilização in vivo. O tratamento utilizado
como controle foi o congelamento com glicerol na concentração de 3%. A melhor
curva de resfriamento após a coleta até 15 °C, foi atingida com o tempo de 120 min.
Foi identificado um fator de 26 kDa no plasma seminal, cuja ausência proporcionou
melhores resultados de integridade de membrana plasmática após o
descongelamento. O uso do crioprotetor intracelular dimetilacetamida na
concentração de 5%, proporcionou nas avaliações in vitro, resultados superiores ao
tratamento controle (glicerol 3%), não diferindo na avaliação in vivo. O presente
estudo demonstrou a relação de componentes do plasma seminal com a qualidade
espermática, além de apresentar um novo protocolo de congelamentodescongelamento
de sêmen suíno baseado no uso de dimetilacetamida 5%.