Expressão heteróloga, purificação e caracterização de proteínas transmembrana de Mycoplasma hyopneumoniae
Abstract
Mycoplasma hyopneumoniae é o agente etiológico da pneumonia enzoótica suína
(PES), uma das doenças respiratórias de suíno mais comum em todo o mundo. Ela
é caracterizada por retardo no desenvolvimento em animais na fase de crescimento
e terminação, causando perdas econômicas consideráveis na indústria suinícola. A
vacinação parece ser a forma mais efetiva de controlar a PES, entretanto, as vacinas
contra a doença disponíveis no mercado apresentam um elevado custo de produção
e conferem uma proteção parcial, não impedindo o estabelecimento da infecção e
nem a presença de suínos portadores. Desta forma, surge à necessidade da
utilização de novas estratégias visando contornar este problema. A tecnologia do
DNA recombinante constitui uma ferramenta importante para o desenvolvimento de
vacinas. As publicações das seqüências de três genomas de M. hyopneumoniae, duas
cepas patogênicas (232 e 7448) e uma não patogênica (J) estão contribuindo com
pesquisas e, acelerando o processo de identificação de novas proteínas
imunogênicas. A partir dos dados gerados e da análise proteômica complementar,
foi possível a identificação de seqüências codificadoras (CDS) de proteínas
transmembrana. Estas seqüências foram clonadas e expressas em E. coli. Um total
de sete proteínas recombinantes foram purificadas e avaliadas quanto à
imunogenicidade em camundongos e à antigenicidade frente a soros de suínos com
PES. Todas as proteínas avaliadas foram capazes de induzir uma resposta imune
significativa em camundongos. O estudo das propriedades antigênicas revelou que
estas são reconhecidas pelo soro de suínos infectados com M. hyopneumoniae. As
proteínas recombinantes avaliadas neste estudo poderão ser de valia para utilização
como vacinas de subunidade e em testes de imunodiagnóstico da PES.