Toxicologia reprodutiva: padrão de ligação e efeitos de lectinas do gênero Canavalia em espermatozoides bovinos
Fecha
2012-02-16Metadatos
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A membrana externa dos espermatozoides de mamíferos é coberta pelo glicocálice,
uma camada rica em carboidratos que é crucial para as funções e interações
dos gametas masculinos com o ambiente extracelular. Vários fatores afetam a
motilidade e a integridade funcional dos espermatozoides, sendo o dano causado
pela produção excessiva de espécies reativas de oxigênio (ROS) um importante
fator. Lectinas são proteínas que se ligam de forma especifica a resíduos de
carboidratos. Essas proteínas são ferramentas úteis para a investigação da
distribuição e alteração de glicoconjugados de membrana. Estudos investigaram o
estresse oxidativo em células espermáticas, porém, até o momento, não foram
realizados trabalhos para avaliar o efeito de lectinas vegetais no estresse oxidativo
em espermatozoides. O presente estudo teve por objetivo investigar o padrão de
ligação e os efeitos das lectinas ConA, extraída de Canavalia ensiformis, ConBol,
extraída de C. boliviana, e ConBr, extraída de C. brasiliensis, na motilidade,
viabilidade, peroxidação lipídica, e geração de ROS em espermatozoides bovinos.
Foi observado que as três lectinas se ligaram aos espermatozóides, mas com
algumas diferenças. A lectina ConA não se ligou ao segmento equatorial, localizado
entre a capa acrossomal e a região pós-acrossomal. Em 18% dos espermatozoides
marcados com ConBol não houve ligação da lectina na região do acrossoma. Já em
45% das células marcadas com ConBr houve uma ligação de aspecto fragmentado a
cabeça do espermatozoide. A incubação com as lectinas do gênero Canavalia
produziu um decréscimo na motilidade. ConA e ConBr demonstraram um grande
efeito na diminuição da motilidade espermática logo após a incubação (13.3 ± 3.3%
em ambas as lectinas vs. 60 ± 5.7%) (P<0.05). A motilidade mais baixa ocorreu com
a concentração de 15 µg/ml de ConBr após 2h de incubação (1.6 ±1.7%). A
viabilidade celular e a peroxidação lipídica não foram afetadas por nenhuma das
lectinas testadas (P>0.05). No entanto, as lectinas ConA, ConBol e ConBr
apresentaram comportamento similar causando um aumento na produção de ROS
ao longo do tempo comparado com o controle (P<0.05). Em conclusão, este estudo
demonstra que as lectinas ConA, ConBol e ConBr ligam-se aos carboidratos de
membrana de espermatozoides bovinos e induzem uma diminuição da motilidade e
aumento na geração de ROS, que pode levar a perda da função celular.