Modelo alternativo utilizando meio simulado do fluído espinhal cerebral (FES) para avaliação da atividade antifúngica de ácidos graxos frente à Cryptococcus spp
Fecha
2018-09-28Metadatos
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A pesquisa de novos métodos para investigar a capacidade de crescimento de espécies de fungos do gênero Cryptococcus é de fundamental importância na avaliação de novos compostos bioativos, como por exemplo, os ácidos graxos alifáticos. Um modelo que já foi proposto para mimetizar as condições do líquido cefalorraquidiano (LCR) foi o fluído espinhal cerebral simulado (FES), que surge como uma alternativa interessante. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antifúngica de ácidos graxos alifáticos frente a espécies de Cryptococcus utilizando o modelo FES. A atividade antioxidante dos ácidos graxos alifáticos foi avaliada usando o ensaio FRAP. A concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração fungicida mínima (CFM) de cada ácido foram determinadas frente a isolados ambientais e a cepas de C. neoformans, C. grubii e C. gattii. A atividade antifúngica também foi avaliada in vitro no FES após inoculação dos fungos. As atividades dos ácidos foram monitoradas pelas curvas de crescimento fúngico e a determinação dos níveis de glicose e proteína totais. Os ácidos graxos apresentaram uma melhor atividade antioxidante do que a vitamina C. Os valores CIM e CFM avaliados nos diferentes fungos foram: ácido cáprico 0,19-0,80 e 0,75-3,04, ácido láurico 0,09-0,80 e 0,19-0,80, ácido caprílico 1,50-6,04 e 0,19-0,80 e ácido undecilênico 0,38-2,94 e 0,38-5,89μg/μL, respectivamente. O crescimento de Cryptococcus spp. no FES foi satisfatório, sendo observado um aumento significativo no número de log UFC/ml no período de cultura de 72 horas. Apenas o ácido láurico foi capaz de inibir o crescimento das três espécies diferentes de Cryptococcus nas concentrações testadas. Os níveis de glicose para C. neoformans reduziram significativamente no tratamento com ácido láurico. Na concentração de 2x CIM, os níveis de glicose foram significativamente reduzidos para o C. grubii, e também para o tratamento com ácido láurico 2x CIM em 24 horas e ácido cáprico a 48 horas nesta concentração. Para C. gattii, os níveis de glicose foram reduzidos significativamente um período de 48 horas para o tratamento com ácido láurico, ácido cáprico a 1⁄2 CIM, CIM e 2x CIM e ácido undecilênico na concentração de 2x CIM em 48 horas. Contudo, não foi observada a redução significativa dos níveis de proteína nas concentrações e tempos testados. Os resultados observados com a aplicação do modelo FES inoculado com espécies de Cryptococcus foi capaz de demonstrar a atividade antifúngica in vitro de ácidos graxos alifáticos. Portanto, o modelo FES pode ser considerado uma alternativa interessante para o estudo de compostos bioativos no LCR.