Efeito toxicológico de nanocápsulas de núcleo lipídico revestidas de quitosana sobre espermatozoides bovinos
Resumo
A nanobiotecnologia é uma área em ascensão, com o surgimento contínuo de novos sistemas para melhorar a eficiência de drogas e terapias. Dentre os novos nanossistemas desenvolvidos as nanocápsulas de núcleo lipídico destacam-se pela capacidade de carrear diferentes tipos de moléculas em seu núcleo ou aderidas à sua superfície. Para que esse e outros novos sistemas sejam empregados comercialmente é preciso comprovar sua atoxicidade e inocuidade animal e ambiental. Suprindo essa necessidade emergente, a toxicologia busca o uso de modelos mais rápidos para triagem, como a utilização de gametas masculinos e a avaliação de parâmetros de fertilidade. Portanto, o objetivo desse estudo foi avaliar o efeito de dois nanossistemas de nanocápsulas de núcleo lipídico, compostas por monoestearato de sorbitano, triglicerídeos cáprico-caprílico, policaprolactona, lecitina e polissorbato, e a segunda estrutura revestida por quitosana, em espermatozoides bovinos para avaliação da toxicidade através de parâmetros de qualidade espermática. A avaliação do perfil e distribuição do tamanho das nanocápsulas foi realizada por difração à laser e espalhamento dinâmico de luz, o potencial zeta foi aferido por eletroforese. Neste estudo foram testados dois nanossistemas, as nanocápsulas de núcleo lipídico (LNC) e nanocápsulas de núcleo lipídico revestida por quitosana (LNC-CS), em amostras comerciais de cinco touros. O efeito das nanocápsulas foi analisado em contato imediato (0 h) e após incubação por 1 h. Foram testadas cinco concentrações de nanocápsulas: 2,5%, 5%, 10%, 20% e 40% (v/v). Uma concentração adicional de 80% foi utilizada para os testes de motilidade. Dois grupos controles foram utilizados, substituindo as nanocápsulas com meio e com água, nas mesmas concentrações. A toxicidade foi avaliada através de alterações no padrão de movimentação dos espermatozoides por CASA, e a citometria celular por citometria de fluxo. Não houve diferença significativa entre os grupos incubados com LNC e LNC-CS e os grupos controles para concentrações de inferiores a 40%. Nos grupos de 40% houve diminuição da motilidade entre grupos experimentais e controle para o parâmetro DAP da análise por CASA nos dois períodos de incubação para os dois nanossistemas, e na integridade da membrana para ambos os tempos no grupo com LNC-CS. A atividade mitocondrial também foi reduzida para LNC-CS em tempo 0 h. Para concentração de 80% nos grupos encubados com LNC e LNC-CS houve redução nos parâmetros de motilidade, DAP, DCL, DSL, VAP, VCL, VSL, STR, LIN, WOB, ALH, BCF. Em conclusão, esse estudo demonstrou a reduzida toxicidade causada apenas em concentrações muito altas, viabilizando a utilização de LNC e LNC-CS como nanocarreador para células espermáticas.