Mycobacterium bovis BCG expressando o antÌgeno Msp1a de Anaplasma marginale: uma vacina candidata contra anaplasmose bovina
Abstract
A cepa vacinal Mycobacterium bovis BCG Pasteur foi utilizada para
expressar a proteÌna Msp1a de Anaplasma marginale. O gene msp1a foi
amplificado por PCR, a partir de DNA de A. marginale extraÌdo de eritrÛcitos
bovinos, e clonado nos vetores pUS2000 e pMIP12, que, posteriormente foram
utilizados para transformar BCG. Camundongos foram imunizados com BCG
recombinante (rBCG), aos 0 e 21 dias de experimento, ficando os grupos
distribuÌdos da seguinte maneira: salina (T1); BCG (T2); rBCG/pUS2000/msp1a
(T3) e rBCG/pMIP12/msp1a (T4). Quarenta e dois dias apÛs a 1™ inoculaÁ„o (dpi),
os camundongos dos tratamentos 3 e 4 desenvolveram resposta imune humoral
contra o antÌgeno de Msp1a. Os resultados obtidos no ELISA demonstraram uma
resposta de anticorpos m·xima aos 63 dpi, sendo que o grupo 4 apresentou uma
resposta maior que os demais grupos testados (P<0,001). Da mesma forma,
produÁ„o de interferon gama especÌfica contra Msp1a foi detectada em cÈlulas de
baÁo de camundongos imunizados com rBCG aos 49 dpi, sendo que o grupo 3
apresentou maiores nÌveis dessa citocina em um ELISA. Anticorpos dos grupos
T3 e T4 foram capazes de reconhecer Msp1a, na sua forma nativa, obtida de
extrato de A. marginale, oriundo de eritrÛcitos de bovinos infectados com a
riquÈtsia. Da mesma forma, o anticorpo monoclonal ANA22B1, especÌfico para um
epitopo de Msp1a, foi capaz de reconhecer rMsp1a, produzida por Escherichia
coli e Mycobacterium bovis BCG Pasteur. Apesar de n„o terem sido realizados
testes em bovinos com essa vacina recombinante, rBCG, expressando Msp1a de
A marginale constitui-se numa potencial estratÈgia de imunizaÁ„o contra
anaplasmose bovina, motivando a continuidade dos estudos.
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