Desenvolvimento de ELISA para o Diagnóstico da Neosporose
Resumo
A neosporose é uma enfermidade causada pelo protozoário intracelular Neospora
caninum esta é de grande importância principalmente em bovinos, pois pode
ocasionar abortos nos animais infectados, causando grandes perdas econômicas
para indústria pecuária de vários países do mundo. No presente estudo, foi relatada
a expressão, purificação e a caracterização da proteína NcSRS2 de N. caninum na
levedura metilotrófica Pichia pastoris. O gene ncsrs2 foi clonado no vetor de
expressão pPICZαB seguindo de integração no genoma da levedura. A proteína
recombinante NcSRS2 foi demonstrada no sobrenadante da cultura onde
posteriormente foi concentrada e purificada. Um ensaio imunoenzimático indireto
(ELISA) foi desenvolvido utilizando soros negativos e positivos de bovinos e ovinos
naturalmente infectados a campo por N. caninum. Este demonstrou que a proteína
recombinante apresentou as características antigênicas da proteína nativa o que
permitiu o seu reconhecimento por soros de diferentes espécies de animais com
neosporose. Os resultados foram comparados com a imunofluorescência indireta
(IFI). O teste diagnóstico ELISA-NcSRS2 descrito no presente trabalho constitui um
método específico e sensível para a detecção de N. caninum em bovinos e ovinos.
Os resultados indicam que a proteína recombinante produzida neste trabalho pode
ser utilizada para o desenvolvimento de métodos diagnósticos com menor custo de
produção e em escala industrial, pois estes são necessários e importantes para a
implantação de medidas de controle adequadas para esta parasitose nos rebanhos
bovinos.