Caracterização da atividade biológica de citocinas recombinantes de hamster sírio dourado (Mesocricetus auratus)
Date
2025-06-25Metadata
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O hamster sírio dourado (Mesocricetus auratus) tem se consolidado como modelo
experimental em estudos de infecções, inflamação e câncer. No entanto, a escassez
de reagentes imunológicos específicos representa uma limitação para o
aprofundamento da caracterização imunológica nesse modelo. Este trabalho teve
como objetivo analisar a atividade biológica das citocinas recombinantes rIL-6,
rIL-10, rIFN-γ, rTGF-β e rTNF-α, produzidas em Escherichia coli, visando sua
aplicação como insumos na composição de kits de detecção e desenvolvimento de
ferramentas imunológicas para o hamster sírio. As proteínas foram expressas,
purificadas, submetidas à remoção de endotoxinas e caracterizadas por SDS-PAGE
e Western blot. A bioatividade foi avaliada por ensaio de viabilidade celular (MTT) em
células CHO-K1 e pela análise da expressão gênica por RT-qPCR. O ensaio MTT
demonstrou que, nas primeiras 24 horas, todas as citocinas - com exceção de rIFN-γ
- promoveram efeito proliferativo significativo sobre as células CHO-K1. A partir de
48 horas, observou-se uma redução progressiva na viabilidade celular para todas as
citocinas. A RT-qPCR revelou que o tratamento com rIL-6 reduziu significativamente
a expressão de tnf-α, sem induzir a transcrição de il-10. A exposição a rIL-10
resultou na diminuição da expressão de tnf-α e ifn-γ, além de não ter induzido il-6.
De forma semelhante, o tratamento com rTGF-β reduziu os níveis de tnf-α e ifn-γ,
também sem detecção de il-6 ou il-10. A estimulação com rIFN-γ levou à redução de
tnf-α, mas não modulou significativamente a expressão de tgf-β, e tampouco induziu
a transcrição de il-6 ou il-10. Esses resultados demonstram que as citocinas
recombinantes de hamster sírio dourado possuem atividade biológica funcional. Tais
evidências reforçam o potencial dessas proteínas como ferramentas úteis para
ensaios imunológicos, contribuindo para o desenvolvimento de reagentes específicos
e para a ampliação da aplicabilidade do hamster sírio como modelo experimental em
diversas áreas da pesquisa científica.