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Caracterização da atividade biológica de citocinas recombinantes de hamster sírio dourado (Mesocricetus auratus)

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Ver/
dissertacao_laura_de_vargas_maiocchi.pdf (1.572Mb)
Fecha
2025-06-25
Autor
Maiocchi, Laura de Vargas
Metadatos
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Resumen
O hamster sírio dourado (Mesocricetus auratus) tem se consolidado como modelo experimental em estudos de infecções, inflamação e câncer. No entanto, a escassez de reagentes imunológicos específicos representa uma limitação para o aprofundamento da caracterização imunológica nesse modelo. Este trabalho teve como objetivo analisar a atividade biológica das citocinas recombinantes rIL-6, rIL-10, rIFN-γ, rTGF-β e rTNF-α, produzidas em Escherichia coli, visando sua aplicação como insumos na composição de kits de detecção e desenvolvimento de ferramentas imunológicas para o hamster sírio. As proteínas foram expressas, purificadas, submetidas à remoção de endotoxinas e caracterizadas por SDS-PAGE e Western blot. A bioatividade foi avaliada por ensaio de viabilidade celular (MTT) em células CHO-K1 e pela análise da expressão gênica por RT-qPCR. O ensaio MTT demonstrou que, nas primeiras 24 horas, todas as citocinas - com exceção de rIFN-γ - promoveram efeito proliferativo significativo sobre as células CHO-K1. A partir de 48 horas, observou-se uma redução progressiva na viabilidade celular para todas as citocinas. A RT-qPCR revelou que o tratamento com rIL-6 reduziu significativamente a expressão de tnf-α, sem induzir a transcrição de il-10. A exposição a rIL-10 resultou na diminuição da expressão de tnf-α e ifn-γ, além de não ter induzido il-6. De forma semelhante, o tratamento com rTGF-β reduziu os níveis de tnf-α e ifn-γ, também sem detecção de il-6 ou il-10. A estimulação com rIFN-γ levou à redução de tnf-α, mas não modulou significativamente a expressão de tgf-β, e tampouco induziu a transcrição de il-6 ou il-10. Esses resultados demonstram que as citocinas recombinantes de hamster sírio dourado possuem atividade biológica funcional. Tais evidências reforçam o potencial dessas proteínas como ferramentas úteis para ensaios imunológicos, contribuindo para o desenvolvimento de reagentes específicos e para a ampliação da aplicabilidade do hamster sírio como modelo experimental em diversas áreas da pesquisa científica.
URI
http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/handle/prefix/17255
Colecciones
  • PPGBiotec: Dissertações e Teses [191]

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